干细胞研究与治疗杂志

抽象的

使用鸡全胚胎培养物对假定的小鼠和人类定形内胚层进行功能测定

玛蒂娜·约翰内森、亨里克·塞姆、帕勒·塞鲁普和马蒂亚斯·汉森

简介： 胚胎干细胞(ESC) 是治疗糖尿病等退行性疾病的潜在细胞来源。一些研究试图重现胚胎发生过程中发生的信号传导事件，探讨了从这种细胞来源生成定形内胚层 (DE) 的问题。然而，DE 随后的分化未能产生功能性胰岛素分泌 β 细胞。为了确保我们有正确的起始材料，我们需要通过评估细胞是否在功能上等同于体内对应细胞来充分表征 ESC 衍生的 DE。因此，本研究的目的是描述一种可以评估 ESC 衍生的 DE 的体内功能的方法。

方法：通过定向分化，从人类和小鼠 ESC 中衍生假定的 DE。随后将该假定的 DE 移植到鸡胚内胚层中，以确定是否发生整合。在移植前和移植后 48 小时通过基因和蛋白质表达分析假定的 DE 。

结果：假定的 DE 源自小鼠和人类 ESC，已成功整合到鸡内胚层中。内胚层特异性基因在整合前在假定的 DE 中表达，内胚层特异性蛋白质在移植后 48 小时进行评估。

结论：我们描述了移植源自 ESC 的假定 DE 的详细方法程序，以及随后对移植细胞的迁移和发育的分析。我们的结果表明，假定的 DE 与鸡内胚层整合并参与鸡肠的发育，表明 ESC 产生了功能性 DE。该功能分析可用于评估源自人类和小鼠 ESC 的功能性 DE 的产生，并为细胞表征提供了有价值的工具。这是向全功能 β 细胞分化过程中重要的初始步骤。