药物分析学报

抽象的

利用猪小梁网进行抗眼压药物筛选的三维胶原凝胶收缩监测系统

葛西博吉、石坂光江、白泽荣一、原秀明

小梁网 (TM) 收缩状态被认为会影响房水流出和眼压 (IOP)。有人提出，TM 松弛可能会通过增加组织孔隙度来增加常规流出并导致眼压下降，因此，它可能是青光眼的治疗目标。因此，我们使用三维 (3-D) 胶原凝胶测定法研究了各种药物对培养的猪小梁网 (pTM) 细胞收缩性的影响，以开发一种筛选方法来识别新型抗眼压药物。我们通过细胞形状和低密度脂蛋白 (LDL) 受体的表达来识别从猪眼球中获得的 pTM 细胞。当嵌入胶原凝胶中时，pTM 细胞表现出依赖于胎牛血清 (FBS) 浓度的收缩活性。各种激酶抑制剂，尤其是细胞周期蛋白依赖性激酶 (rescovitine)、rho 和 Ca2+ 依赖性蛋白激酶 (Y-27632)、酪氨酸激酶 (tyrphostin AG879)、磷脂酰肌醇 3-激酶 (bisindolylmaleimide I, BIM I) 和 Ca2+/钙调蛋白激酶 (chelerythrine) 的抑制剂，可强烈抑制胶原凝胶收缩。依他尼酸、Na+、K+-ATPase (ouabain)、Ca2+-ATPase (thapsigargin) 和 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶 A (HMG-CoA) 还原酶的抑制剂、非选择性磷酸二酯酶抑制剂 (papaverine)、腺苷 A2 (metrifudil) 和大麻素受体 (CP-55940) 激动剂也可抑制这种收缩。此外，BIM I、辛伐他汀、BQ-123 和 CP-55940 表现出部分细胞毒性。白屈菜红碱和毒胡萝卜素的抑制活性也归因于细胞毒性。这些发现表明，这种体外 3-D 胶原凝胶收缩监测系统可用作快速灵敏的筛选方法，用于识别诱导 pTM 细胞松弛的新型药物，并可同时检测主要作用和副作用。