微生物与生化技术杂志

抽象的

用于检测食品中沙门氏菌和大肠杆菌污染的抗 LPS 试纸

Alvin Wang、Gabriel Molina、Victor Prima 和 Kevin KW Wang

大肠杆菌和沙门氏菌等肠道细菌会释放内毒素或脂多糖 (LPS)，从而导致食物中毒症状。我们假设可以通过简单的试纸测试检测出 LPS，从而检测出食物中是否存在肠道细菌。这里我们描述了一种新型抗 LPS 检测试纸测试的开发。将一端粘附有吸水聚偏氟乙烯膜的柔性聚苯乙烯测试条暴露于各种稀释度的食物或细菌源中。随后依次与抗 LPS 一抗、生物素化二抗和链霉亲和素连接的酶碱性磷酸酶一起孵育。然后用底物 5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸盐/硝基蓝四唑显色测试条。因此，紫色沉淀产物的存在表明存在 LPS 和肠道细菌。通过光密度测定量化颜色的强度或暗度，并与 LPS 标准曲线进行比较。结果表明，试纸条检测可以轻松检测出低至 25 ng/mL 的纯化 LPS。此外，抗 LPS 试纸条检测可以灵敏地检测和量化活大肠杆菌释放到培养基中的 LPS。最后，在室温下将三组食物（草莓片、菠菜叶和碎牛肉）接种大肠杆菌两个时间点，然后将每种食物制备的冲洗水进行抗 LPS 试纸条检测。对于所有三组食物，试纸条检测可以轻松检测和量化 8 小时和 24 小时的细菌污染，而不是它们各自的未污染对照。总之，开发了一种简单的原型抗 LPS 试纸条测试，可以轻松检测常见食物的肠道细菌污染。