干细胞研究与治疗杂志

抽象的

射频电刺激脂肪干细胞向软骨细胞分化

玛丽亚·路易莎·埃尔南德斯-布勒、玛丽亚·安赫莱斯·特里洛、玛丽亚·安赫莱斯·马丁内斯-加西亚、卡洛斯·阿比拉胡德和亚历杭德罗·乌贝达

目的：尽管基于电热射频电流透皮应用的电容电阻电转移 (CRET) 疗法在创伤或退行性组织损伤的再生方面表现出良好的治疗效果，但其对软骨等再生能力较差的组织的潜在影响尚未得到充分研究。本文我们研究了通常用于 CRET 疗法的 448 kHz 电流对人类脂肪干细胞 (ADSC) 早期软骨分化的影响。

材料和方法：从健康供体获得的干细胞在软骨培养基中分化 16 天。在培养的最后 2 天，将培养物间歇性暴露或假暴露于 448 kHz 正弦波电流，电流密度为 50 μA/mm ²亚热。通过以下方法评估细胞反应：XTT 增殖测定、糖胺聚糖 (GAG) 和胶原定量（图像分析、Blyscan 测定和免疫印迹）以及软骨因子 Sox5 和 Sox6 的表达分析，以及转录因子 ERK1/2 及其活性形式 p-ERK1/2 的表达分析（免疫荧光、免疫印迹和 RT-PCR）。

结果：电刺激显著增加了分化培养物细胞外基质中软骨特异性 II 型胶原和 GAG 的水平。尽管在 48 小时治疗结束时未观察到 SOX 基因表达的变化，但刺激确实诱导了转录因子 L-Sox5、Sox6 和 p-ERK1/2 的显著过度表达。由于这些蛋白质是软骨分化过程中细胞外基质合成的关键调节剂，因此它们的过度表达很可能与观察到的细胞外胶原和 GAG 含量的增加有关。

结论：本数据集支持了以下假设：CRET 疗法中应用的电热治疗的电成分可以通过促进软骨分化来刺激软骨修复。这些数据与之前报道的结果相结合，即用相同类型的亚热电信号进行体外治疗可促进未分化 ADSC 的增殖，确定了此类射频电流的潜在修复和再生作用背后的分子现象。