干细胞研究与治疗杂志

抽象的

冷冻保存对长期扩增脂肪干细胞的细胞功能有影响

Ali El Othmani、Sabrina Rouam、Anass Abbad、Chaimaa Erraoui、Sara Harriba、Hassan Boukind、Jalal Nourlil、Gabriel Malka 和 Loubna Mazini

目的：脂肪干细胞 (ADSC) 是免疫原性较低的细胞，具有异源性细胞因子分泌特征，使其成为细胞免疫疗法的更好候选者。无论是先天还是受刺激，ADSC 分泌的白细胞介素 6 (IL-6) 和 Toll 样受体 2 (TLR2) 都会受到调节，并通过不同的炎症因子分泌导致不同的炎症机制途径。这些特性在治疗炎症相关的慢性疾病方面非常有用。在移植或冷冻保存之前，离体 ADSC 扩增是一个关键问题。据报道，培养扩增过程中的功能性细胞变化易受冻融效应相互作用，从而导致对细胞治疗结果的怀疑。本研究的目的是确定在扩增培养的不同时间点冻融对 IL-6 和 TLR2 分泌的影响。
方法：从年轻女性捐赠者身上采集 ADSC，培养扩增，每次传代后在胎牛血清 (FBS) 和二甲基亚砜 (DMSO) 中冷冻保存 6 个月至一年。然后在冷冻保存前 (新鲜) 和解冻后检测 ADSC 的增殖、克隆形成性、细胞因子基因表达并进行评估，并培养至汇合 (冷冻/解冻)。在第 0 代 (P0) 保存的 ADSC 在 P1 汇合后解冻并进行测试。
结果：与新鲜 ADSC 相比，P1 冷冻保存的 ADSC 导致克隆形成性、总 RNA 和蛋白质分泌增加。IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子 (TNF)-α 和 TLR2 的相对定量 (RQ) 和细胞因子评估显示 TLR2 适度上调，而长期扩增和冷冻保存的 ADSC 中观察到显着更高的 IL-6 分泌水平。
结论：我们的结果表明，长期培养扩增的冷冻保存的 ADSC 在功能上有所不同，并且可能通过调节 IL-6 和 TLR2 激活的炎症反应而损害免疫抑制特性。