徐福洲、曾喜民、林俊
空肠弯曲菌是许多工业化国家引起人类肠炎的主要细菌。目前尚无针对空肠弯曲菌的商业疫苗。CmeC 是 CmeABC 多药外排泵的重要组成部分，在空肠弯曲菌的抗生素耐药性和体内定植中起着关键作用。CmeC 在空肠弯曲菌菌株中普遍存在，并在体内被显著诱导并具有免疫原性。在本研究中，我们分析了 CmeC 序列同源性，检查了 CmeC 肽抗体的体外免疫保护作用，并生产了全长重组 CmeC (rCmeC)，以使用鸡模型系统评估 CmeC 亚单位疫苗对空肠弯曲菌的免疫原性和保护效果。对 24 种不同空肠弯曲菌菌株的 CmeC 氨基酸序列进行了测定并进行了比对，结果显示 CmeC 在空肠弯曲菌中高度保守，同一性范围为 97.3% 至 100%。 CmeC 肽抗体抑制了 CmeABC 外排泵的功能，增强了空肠弯曲菌对胆汁盐（肠道中存在的天然抗菌剂）的敏感性。在大肠杆菌中产生了两种带有 N 端或 C 端 His 标签的全长 rCmeC 蛋白；通过一步亲和纯化获得了高纯度和高产量的 N 端 His 标记的 rCmeC。纯化的 rCmeC 在使用空肠弯曲菌感染鸡模型的两次疫苗接种试验中使用。通过口服疫苗刺激 CmeC 特异性血清 IgG 反应需要使用更高剂量的 rCmeC（200µg）以及 70µg 粘膜佐剂 mLT（改良的大肠杆菌不耐热肠毒素）进行免疫。给鸡皮下接种 rCmeC 可显著刺激血清 IgG 和 IgA 反应。然而，无论采用何种疫苗接种方案，CmeC 特异性肠道分泌型 IgA 反应均未得到显著刺激，并且 rCmeC 疫苗接种未提供针对空肠弯曲菌感染的保护。总之，这些发现进一步有力地证明了 CmeC 是一种有希望的针对空肠弯曲菌感染的亚单位疫苗候选物。然而，应优化 CmeC 疫苗接种方案，以增强肠道中 CmeC 特异性粘膜免疫反应，从而保护机体免受空肠弯曲菌感染。