干细胞研究与治疗杂志

抽象的

Dgcr8 对于胚胎干细胞的心脏谱系特征化必不可少

雷志勇、Alain van Mil、Annebel M van de Vrugt、Pieter A Doevendans 和 Joost PG Sluijter

目的： microRNA 已被证实在细胞行为和谱系特征（包括心脏分化）中发挥重要作用。然而，由于缺乏适当的细胞模型，对其在心肌细胞分化中的作用的全面了解受到了阻碍。在这里，我们使用了缺乏重要微处理器 Dgcr8（或 Pasha）的胚胎干细胞 (ESC)，这允许引入单个 miRNA 来研究它们在心脏分化中的作用并进行更精确的目标选择。
方法：在含有小鼠胚胎成纤维细胞饲养层的 LIF 补充 ESC 培养基中培养 Dgcr8 KO ESC，并使用基于胚胎体的分化方案诱导心脏分化。通过使用免疫荧光染色和半定量 PCR 测量心脏标志物的 mRNA 和蛋白质水平以及异染色质变化来监测分化。
结果和结论：我们发现 Dgcr8 KO ESC 确实缺乏大量小 RNA，包括但不限于成熟的 microRNA。 KO 细胞的增殖率较低，无法分化为心脏谱系。令我们惊讶的是，除了 microRNA 处理缺陷外，Dgcr8 KO 胚胎干细胞无法形成适当的异染色质，也无法使基因毒性着丝粒重复元件失活。我们的结果表明，除了控制 microRNA 处理外，Dgcr8 可能在异染色质沉默中发挥着以前未被认识到的作用。