干细胞研究与治疗杂志

抽象的

半自动处理的人类脂肪干细胞在添加自体血清和抗氧化剂的培养基中的扩增

孙立毅、李殿坤、陈宝仁、何玉玉、郭俊山、程庆峰、李桂芳、张耀仁、庞正勇

目的：切除的脂肪组织 (EFT) 是用于自体细胞治疗的脂肪干细胞 (ADSC) 的极佳来源。然而，目前使用传统手术剪刀切除脂肪组织并使用含有胎牛血清 (FBS) 的培养基的技术可能不符合良好组织规范 (GTP) 指南。因此，我们开发了一种符合上述指南的半自动化流程，以从少量 EFT 中制造临床级 ADSC。方法：开发了一种半自动化流程，使用在管分散工作站上操作的一次性分散管从 EFT 中获取基质血管部分 (SVF)。配制了一种补充有人类自体血清 (HAS) 和间充质干细胞培养佐剂 (MCA) 的培养基，该培养基由碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF/FGF-2) 和抗氧化剂组成，用于体外扩增来自 SVF 的 ADSC。结果：半自动化流程可显著提高细胞产量，并将组织切碎操作时间从一小时缩短至几分钟。ADSC 在 10% HAS 培养基中的生长速度比在添加 FBS 的培养基中慢，但在含有 MCA（10% HAS+MCA）的 10% HAS 培养基中的生长速度优于这两种培养基。10% HAS+MCA 培养基还促进了脂肪形成、成骨、软骨形成，并增加了 ADSC 中 CD44、CD73 和干性基因的表达。结论：我们新颖的半自动化流程可有效分离 SVF，10% HAS+MCA 培养基可加速 ADSC 从少量 EFT 中生长，而不会失去其分化能力。