微生物与生化技术杂志

抽象的

SAK融合人干扰素α在大肠杆菌中的表达及抑制

Shardul Salunkhe、Bhaskarjyoti Prasad、Ketaki Sabnis-Prasad、Anjali Apte-Deshpande 和 Sriram Padmanabhan

描述了一种改进大肠杆菌来源的人干扰素-α (rhIFN ?2b)从包涵体中作为葡萄球菌融合蛋白(SAK)融合蛋白的重新折叠和封闭方法。这种蛋白需要补充稀有密码子来表达，并且在37°C下稳定。重新折叠的最佳条件是使用温和的变性剂，而消耗任何其他试剂来防止聚集。SAKrhIFN ?2b融合蛋白通过两步收缩成功闭合，并利用肠道将其间隙形成两个碎片，即SAK和IFN。发现这两种融合蛋白都具有生物活性，表明这两种融合蛋白都正确折叠。 -HPLC上显示出与细菌来源的未标记收缩IFN 相似的保留时间，以及在Agilent 2100 Bioanalyzer实验上的相似，表明肠间隙后IFN 的处理正确。在类似的条件下，SAK-IFN的表达水平比未标记的IFN的表达水平高出两倍。