药物基因组学和药物蛋白质组学杂志

抽象的

基于细菌质粒 pMAL-C2X 的自制 100 对碱基 DNA 梯状物

Firuzeh Badreh1、Khodakaram Jahanbin2、Ali Khodadadi2、Ali Khorasani Zadeh2、Moosa Sharifat2、Milad Khayati2、Mohammad Rashno2,3

背景：大多数分子生物学研究成果在日常工作中需要利用DNA Ladders等标记物通过电泳法检测和量化核酸片段的长度。

方法：本研究报道了一种基于PCR技术的100对碱基DNA梯状条带的制备方法，以细菌质粒pMAL-C2X为模板进行PCR，PCR产物经苯酚/氯仿提取，乙醇沉淀，按比例混合。

结果：成功设计了一组7个引物（5个反向引物和2个正向引物），用nanodrop定量PCR扩增片段，用1.5％琼脂糖凝胶电泳法测定条带大小，并用市售的100bp Ladder共迁移条带，结果显示PCR一次反应成功生成了100bp-1000bp清晰的条带。

结论：本自制产品是具有商业市场的竞争力产品，且制备方法简单、成本低，非特异性条带出现概率低。