詹妮弗·鲁特林、马蒂亚斯·伊尔默、亚历杭德罗·雷西奥、迈克尔·科尔曼、乔迪·维库卡尔和埃克哈德·阿尔特
细胞疗法代表了治疗心脏病的一种有前途的新模式,心脏病是工业化世界的主要死亡原因。最近发现的组织驻留 c-Kit+ 心脏祖细胞 (CPC) 推动了科学界努力利用这些细胞进行再生干预治疗,而心肌细胞的原代培养是一种常见的体外模型,用于研究心脏退化和再生的基本分子机制。目前的心肌细胞分离方案通常会导致细胞产量低和成纤维细胞消耗不足,从而导致培养中的心肌细胞过度生长。在本方案中,我们描述了一种分离新生大鼠心肌细胞的改进方法,该方法还可以提高 CPC 的产量。温和的酶和机械组织处理技术可确保高细胞数量和活力,而随后的 Percoll 密度梯度离心可最大限度地减少成纤维细胞。我们比较了不同酶的优点,发现胶原酶 2 单独使用可产生非常高的心肌细胞产量,而使用 Matrase™ 酶混合物可将 c-Kit+ CPC 的相对产量提高至 35%。使用此方案分离的心肌细胞和 CPC 可能构成研究心脏病以及基于细胞的治疗方法的重要细胞来源。