致癌与突变杂志

抽象的

HCT 116 结肠直肠细胞中的 L-plastin 表达以 NADPH 氧化酶依赖的方式增加迁移和 ROS

艾丽丝·弗兰、迈克尔·弗里利、艾迪恩·朗

目的： L-plastin 是一种作用束蛋白，通常在造血细胞中表达，但也与恶性转化有关。L-plastin 的异常表达与结直肠癌的肿瘤分期相关，结肠癌细胞系中 L-plastin 的异位表达会增加增殖和迁移。L-plastin 在 Ser ⁵上可诱导磷酸化以响应一系列刺激，但磷酸化 L-plastin 在结肠癌细胞中的作用尚未确定。本研究旨在分析 L-plastin Ser ⁵磷酸化对 HCT 116 结肠癌细胞增殖和迁移的影响。

方法：在 HCT 116 细胞中表达野生型 L-plastin 或 Ser ⁵ L-plastin 突变体（其中丝氨酸被替换为不可磷酸化的丙氨酸）。通过细胞计数和细胞周期蛋白 D 激活来评估细胞增殖。使用 transwell 迁移试验来评估细胞迁移。

结果：我们发现野生型 L-plastin 在 HCT 116 细胞中表达时在 Ser ⁵上被组成性磷酸化，并促进这些细胞的增殖率增加。稳定表达野生型 L-plastin 的 HCT 116 细胞也增加了这些细胞的迁移能力，同时增加了活性氧水平。NADPH 氧化酶是活性氧的主要细胞内来源，用药理学抑制剂 DPI 抑制 NADPH 氧化酶活性可降低这些细胞的迁移率。有趣的是，用不可磷酸化的丙氨酸代替 Ser ^{5表达 L-plastin 突变体不会促进细胞增殖增加，表明磷酸化是此过程所必需的。相反，细胞迁移和 ROS 产生与 Ser 5}的磷酸化状态无关。

结论：这些数据表明，HCT 116 结肠癌细胞中的 L-plastin 表达以依赖于 NADPH 氧化酶但不依赖于 Ser ⁵磷酸化状态的方式增加迁移。