帕特里克·C·贝尔、尤尔根·M·奥弗拉特、安雅·厄布斯哈特、拉尔夫·舒伯特和赫尔穆特·盖革
目的:干细胞疗法似乎是支持器官衰竭和组织损伤后再生的一种有前途的选择。MSCs的移植需要具有最大再生能力的细胞。因此,迫切需要研究提高MSCs再生因子释放的新策略。
方法:从脂肪抽吸物中分离、鉴定和培养人类脂肪来源的基质/干细胞 (ASC)。细胞要么在标准条件下培养,要么在低氧环境 (0.5% O2) 中孵育,或在重组人类肿瘤坏死因子-α (TNFα) 或重组人类表皮生长因子 (EGF) 存在下在常氧环境中孵育 48 小时,以进行预处理。首先,通过 qPCR 分析评估七种选定的再生促进因子。然后使用市售的 507 种蛋白质阵列估计 ASC 的分泌蛋白组。
结果: PCR 分析显示三种预处理对 ASC 基因表达的诱导不同。缺氧条件下的 ASC 表现出 VEGF、FGF-7 和 IGF-II 的 mRNA 显著诱导,而其他预处理未引起 VEGF 表达的显著变化。缺氧条件下和与 TNFα 孵育时,HB-EGF 和 M-CSF 的基因表达显著诱导,但 EGF 未诱导。三种预处理方案均未显著诱导血管生成素样 1 mRNA。蛋白质阵列评估显示,在所研究的 507 种蛋白质中,有 21.9% 在缺氧孵育后增加了五倍以上(507 种蛋白质中的 111 种)。与 EGF 预孵育导致上调 32.3%(164/507),而 TNFα 上调了所有评估蛋白质中的 28.8%(146/507)。
结论:研究结果表明,三种预处理方案均诱导了多种蛋白质。然而,短期 EGF 预处理诱导的蛋白质数量最多,因此似乎是细胞治疗方法的最佳预处理方案。