微生物与生化技术杂志

抽象的

使用 BioNanoPore 膜和实时 PCR 对培养物和人工痰液中的结核分枝杆菌检测进行初步评估

James V. Rogers 和 Young W. Choi

快速检测和诊断结核分枝杆菌
对于评估疾病严重程度、治疗和疗法的有效性以及公共卫生监测至关重要。这项研究评估了一种 BioNanoPore 技术（BNP™ Middlebrook 琼脂），以比传统的平板计数方法更短的时间内检测和定量结核分枝杆菌。BNP™ Middlebrook 能够在 5 天内从活跃生长的培养物和接种的人工痰中目测检测出结核分枝杆菌；然而，在 Middlebrook 7H10 琼脂上看不到菌落。在 BNP™ Middlebrook 上有或没有人工痰的情况下孵育 19 天的培养物，液体培养中的结核分枝杆菌范围为 5.81-5.86 log10CFU/mL，人工痰中的结核分枝杆菌范围为 6.39-6.50 log10CFU/mL；在 Middlebrook 7H10 上，液体培养中结核分枝杆菌的计数范围为 5.70-5.85 log10CFU/mL。通过实时 PCR检测，从 BNP™ Middlebrook 和 Middlebrook 7H10 培养基中评估的 19 天培养物中的所有菌落对结核分枝杆菌插入序列 (IS) 6110 呈阳性。这项研究表明，无论是否存在模拟生物基质（人工痰），BNP™ Middlebrook 都能比标准平板技术更快地检测出结核分枝杆菌。此外，BNP™ Middlebrook 显色步骤不会干扰 IS 6110 的实时 PCR 检测。这项研究初步评估了 BNP™ Middlebrook在临床标本评估、治疗/疫苗效力或流行病学监测方面更快速筛查和检测活结核分枝杆菌的潜在用途。