生物化学与分析生物化学

抽象的

柴胡皂苷C单克隆抗体的制备及酶联免疫吸附试验的建立

曲保平、赛嘉阳、曲惠华、刘书臣、程金军、单文超、赵岩、王庆国

采用脾细胞与次黄嘌呤-氨基蝶呤-胸苷敏感的小鼠骨髓瘤SP2/0细胞融合，制备了抗柴胡皂苷c (SSc)单克隆抗体( MAb) 1E11D8 。所制备的抗SSc MAb-1E11D8具有新特性，对柴胡中三种主要齐墩果烷型皂苷柴胡皂苷c、柴胡皂苷d和柴胡皂苷a表现出高度特异性。利用抗SSc MAb-1E11D8建立了一种可靠的ELISA检测SSc的方法。在间接竞争ELISA (icELISA)中，该系统对SSc的检测范围为156.25 ng·mL-1至2500 ng·mL-1。回归方程为 y=-0.283 ln(C) +2.3301，相关系数为 0.99。icELISA 方法的精密度和准确度通过孔与孔之间（测定内）和板与板之间（测定间）的重复性差异来评估。这些参数的值均在正常范围内（<10%）。回收率范围为 99.82% 至 103.59%。进一步验证了 ELISA 方法可用于检测中药方中的 SSc。