细菌学与寄生虫学杂志

抽象的

金黄色葡萄球菌ASIA4的葡萄激酶的产生及特性

努拉·哈桑·阿尔扎拉尼、法里德·肖基·埃尔-谢纳维*

从不同的临床样本中分离出六种临床金黄色葡萄球菌菌株。分离株 ASIA1 和 ASIA2 分离自尿路感染患者的尿液样本；ASIA3 分离自艾斯尤特大学医院烧伤脓肿患者的拭子样本，ASIA4、ASIA5 和 ASIA6 分离自南埃及癌症研究所不同癌症患者的血液样本。所有分离株在血琼脂、加热血浆琼脂、酪蛋白琼脂和脱脂乳琼脂平板上均表现出产生不同直径水解晕圈的能力，凝块溶解率也不同。金黄色葡萄球菌 ASIA3、ASIA4 和 ASIA6 在胰蛋白胨大豆肉汤中产生的葡萄球菌激酶分别为 4.83、5.98 和 2.08 U/mL，而在酪蛋白水解物酵母提取物肉汤中产生的葡萄球菌激酶分别为 1.95、2.08 和 1.70 U/mL。另一方面，金黄色葡萄球菌 ASIA1、ASIA2 和 ASIA5 在 CYEB 上的产量分别为 2.20、2.93 和 3.65 U/mL，而在 TSB 作为生产培养基上的产量分别为 2.10、1.88 和 3.41 U/mL。在由 5.0 g 蔗糖作为碳源、10.0 g 大豆作为氮源、5.0 g NaCl、5.0 g K2HPO4 和 pH 7.0 组成的优化发酵培养基中接种分离株 ASIA4 并在 35°C 下孵育 24 小时后，高活性生产者金黄色葡萄球菌 ASIA4 产生的葡萄激酶增加了 7.64 倍（从 2.08 U/mL 增加到 15.88 U/mL）。此外，在最佳酶促反应条件下，葡激酶活性达到峰值，即反应时间 25 分钟，酪蛋白作为底物，反应 pH 8.0，反应温度 40°C。此外，在温度范围为 15 至 45°C 和 pH 范围为 pH 6.0 至 9.0 时，葡激酶活性保持 100%。EDTA 抑制酶活性从 30.0 增加到 90.0 mM，抑制率为 3.0% 至 32.2%。浓度为 30 mM 的 MgCl2 使酶活性增加 4%，然后在更高浓度下略有下降，但浓度低于 90 mM 时，NaCl 是有效的葡激酶激活剂。