干细胞研究与治疗杂志

抽象的

生产符合良好生产规范的马脂肪来源间充质干细胞用于治疗用途

Shashank Gowda、Aarya Hari、Basavaraj Chougule、Manoj Kumar Reddy、Abhishek Chandanan、Minita Sodhi、Nicole Koshy、Lyle Fonseca 和 Satish Totey

目前，马临床研究正在评估间充质干细胞 (MSC) 治疗各种疾病和损伤的潜力。研究表明，自体和同种异体干细胞似乎都是安全的。然而，需要一种可靠且经济高效的细胞扩增方法来提供现成的临床级干细胞。我们的研究旨在确定高效大规模干细胞扩增的最佳培养条件。我们大规模生产了 cGMP 标准的马脂肪来源间充质干细胞。五种不同的培养基组合——杜氏改良伊格尔培养基敲除 (DMEM-KO)、α改良最低必需培养基 (α-MEM)、50:50 DMEM-KO/α-MEM、75:25 DMEM-KO/α-MEM 和 25:75 DMEM-KO/α-MEM——接种密度分别为 1000、2000、3000、4000 和 5000 个细胞/cm2，用于确定大规模生产的最佳培养条件。分析了生长动力学、免疫表型、核型、形态、三系分化、T 细胞增殖、病毒阳性、临床前毒性和多能性标志物的表达。在测试的培养基组合和接种密度中，发现 25:75 DMEM-KO/α-MEM 以 5000 个细胞/cm2 的接种密度最适合大规模扩增。该培养基组合的细胞产量明显高于其他培养基组合，同时保留了其干细胞特性和分化潜能。结果表明，采用适当的培养系统可显著提高细胞产量，从而能够以经济高效的方式生产足够的细胞用于治疗应用。结果还表明，大规模扩增方法对细胞的操作最少，并且可以在两次传代内进行体外扩增，同时保留了真正的干细胞特性。