生物等效性和生物利用度杂志

抽象的

快速平衡透析 (RED)：一种使用人类和大鼠血浆进行血浆蛋白结合的体外高通量筛选技术

Jitendra Kumar Singh、Anant Solanki、Reema C Maniyar、Debarupa Banerjee 和 Vikas S Shirsath

确定分子与血浆蛋白的结合程度是药物开发的关键阶段，因为血浆结合药物的量会影响化合物的剂量、疗效、清除率和药物相互作用的可能性。因此，确定血浆中测试样品的游离（%Fu）和结合（%Bound）部分是一个关键参数，在药物发现和开发过程中通常会确定该参数。平衡透析是一种公认​​的标准方法，可用于可靠地估计血浆中非结合药物部分。虽然平衡透析是首选方法，但它历来是劳动密集型、耗时、成本高昂且难以自动化的。使用 LC-MS/MS 的快速平衡透析 (RED) 药物-蛋白质结合测定法是使用一种新技术开发的，该技术显著提高了测定精度并具有速度优势。在人类和大鼠血浆中测试了一组涵盖一系列预期蛋白质结合的化合物。开发了一种灵敏且选择性强的方法，使用四重串联质谱仪与电喷雾电离相结合，对预处理血浆中的未结合药物进行定量分析。所用的流动相为 0.1% 甲酸/乙腈：0.1% 甲酸/水，采用梯度 HPLC 法。通过 ESI 模式下的质谱仪检测未结合的药物部分。此外，将一组十种化合物的数据与文献值进行了比较。使用所述方法，可以在药物发现环境中筛选相对大量的 PPB 化合物。