水产养殖研究与发展杂志

抽象的

PmRab7 调控在 WSSV 感染中的作用及小分子作为 PmRab7 GTPase 抑制剂的功能验证

Amrendra Kumar、Sudhanshu Shekhar 和 Saravanakumar A*

白斑综合征 (WSS) 是一种病毒性疾病，严重威胁着养虾业。它是由白斑综合征杆状病毒 (WSSB) 引起的。由于适应性免疫反应不明确，对虾 (P. monodon 和 L. vannamei) 无法通过“非自身”物质和病原体保护自己。因此，本研究优先研究 PmRab7 转录物的调控，在暗示小分子抑制剂后，PmRab7 转录物可能是 WSSV (vP28) 的受体。最初针对 PmRab7 的 3D 结构筛选了总共 70 个 GTPase 小分子。其中，在 GTP、GDP 和 Mg++ 存在下，选择 CID 1067700 分子与 PmRab7 进行分子对接 (IFD)。此外，将小分子以饲料配方喂给 P. monodon，并在 WSSV 感染期间相对量化 PmRab7 相对于 IFN-α 的转录调控作为管家基因。在此，我们使用虚拟筛选策略通过靶向 PmRab7 的 DNA 结合域确定了一种 PmRab7 抑制剂 CID 1067700。CID 1067700 优先抑制 GTPase 活性，从而改变 GTP 和 Mg++ 的位置。此外，CID 1067700 抑制 PmRab7 下游靶基因的表达，因此 CID 1067700 代表了开发针对 PmRab7 DNA 结合域的特定抑制剂和潜在治疗 WSSV 的新探针。在 CID 106700 的初步试验中观察到 PmRab7 调节和 WSSV 增殖的显著变化。CID 106700 通过改变 GTP 和 Mg++ 的天然位置成功灭活 PmRab7。在感染 72 小时内，PmRab7 调节增加了 5 到 8 倍。小分子 GTP 替换表明 PmRab7 基因在 WSSV 感染期间显著下调。值得注意的是，当 PmRab7 下调时，病毒载量（绝对量化）也被发现减少。WSSV 内化与 PmRab7 的调节直接相关。