生物等效性和生物利用度杂志

抽象的

高效液相色谱法同时定量分析人体血浆中的维生素 D-2、维生素 D-3 及其 25-羟基代谢物

赛义德·N·阿尔维、艾哈迈德·优素福和穆罕默德·M·哈马米

开发并验证了一种简单可靠的高效液相色谱 (HPLC) 方法，用于同时测定人血浆中的维生素 D-2 (VD-2)、维生素 D-3 (VD-3)、25-羟基维生素 D-2 [25 (OH) VD-2] 和 25-羟基维生素 D-3 [25(OH) VD-3]。用甲醇和异丙醇混合物去除血浆样品中的蛋白质，并用己烷萃取。蒸发后，将残留物溶解在甲醇：水（9.6：0.4，v/v）中，离心，然后将澄清溶液注入 Zorbax C18 柱。流动相（梯度洗脱模式）由甲醇、乙腈和水（pH = 3.0）组成；洗脱液由光电二极管阵列检测器监测（波长设定为 265 nm）。血浆中VD-2、VD-3、25(OH)VD-2、25(OH)VD-3的浓度与内标峰面积比在5～100ng/mL范围内呈线性关系，日间和日内测定的变异系数均≤9.7%，偏差≤13.1%。血浆中VD-2、VD-3、25(OH)VD-2、25(OH)VD-3的平均提取回收率均在80%以上。该方法用于测定健康受试者血浆中的维生素D水平，并用于评估临床实验室各种条件下血浆中VD-2、VD-3、25(OH)VD-2、25(OH)VD-3的稳定性。