Adelene SM Auyong、Rebecca Ford 和 Paul WJ Taylor
植物病原真菌Colletotrichum truncatum 通过直接穿透角质层感染和定植于辣椒果实。C. truncatum 的角质酶基因 (CtCut1) 是一种角质降解酶,经鉴定和克隆后表明其对破坏辣椒果实角质层至关重要。通过 RNA 介导的基因沉默研究了 CtCut1 基因的表达,并证明了其对真菌致病性的影响。构建了编码 GFP 和 CtCut1 发夹 RNA 的载体 pAA1,并将其转化到 C. truncatum 致病型 F8-3B(毒性菌株)中。与野生型相比,F8-3B-pAA1 转化体表现出感染模式减少,其中一个分离株的角质酶活性降低了 45.8%(CtCut1 转录本减少)。重要的是,CtCut1 缺陷菌株无法像野生型那样有效地感染离体辣椒和大豆宿主。转化体的感染期有所延迟。尽管如此,人工损伤表皮使得这些 F8-3B-pAA1 转化体能够感染和定植宿主组织,从而导致典型的炭疽病病变。结合显微镜检查,这些数据表明致病性缺陷可能是由于无法穿透宿主角质层。对植物-真菌相互作用的了解源于 C. truncatum 真菌转化系统的开发和 RNAi 技术的实施。因此,该技术为研究基因功能(特别是必需致病基因)提供了一种替代的遗传工具。