Marek Malecki、Xenia Tombokan、Mark Anderson、Raf Malecki 和 Michael Beauchaine
简介:睾丸癌是目前最常见的肿瘤,也是 15-35 岁男性发病的主要原因。其发病率正在上升。胚胎癌是其最恶性的形式,它可能对疗法有抗药性或可能对疗法产生抗药性,从而导致复发。据推测,癌症干细胞是这些现象的驱动因素。具体目标:这项工作的具体目标是识别和分离单个活体癌症干细胞的光谱,这些细胞直接从患者的活检中获取,然后测试其多能性。患者方法:从临床和组织学诊断为原发性纯睾丸胚胎癌的患者身上获取活检样本。针对 TRA-1-60 和 SSEA-4 的抗体经过生物工程改造,使其具有磁性或荧光性。通过多光子荧光光谱 (MPFS)、流式细胞术(FCM)、免疫印迹 (IB)、核磁共振光谱 (NMRS) 和全反射 x 射线光谱 (TRXFS) 分析了 TRA-1-60 和 SSEA-4 的细胞表面展示。通过磁性或荧光分选分离单个活细胞,然后进行克隆扩增。通过 qRTPCR 分析 OCT4A、SOX2 和 NANOG 基因的转录本,并通过 IB 和 MPFS 分析产物。结果:从诊断为纯睾丸胚胎癌的患者获得的活检样本中直接鉴定和分离出具有强表面展示 TRA-1-60 和 SSEA-4 的细胞克隆。这些细胞表现出高水平的多能性基因转录和翻译:OCT4A、SOX2 和 NANOG。它们形成胚状体,分化为外胚层、中胚层和内胚层。结论:在直接从患者身上获得的睾丸纯胚胎癌中,我们以高活力和选择性识别、分离并分析了多能干细胞的克隆。这些结果可能有助于解释这些肿瘤的治疗耐药性和复发,以及设计有针对性的个性化治疗。