Awonfor Franklyn、王亚军、于娜、王剑波、乐其君、曹晓欢和郑华坤
与硬骨鱼类似,大黄鱼的摄食偏好由食物的气味和味道决定,而这主要由嗅觉系统控制。将十种不同浓度的 L 型氨基酸引入大黄鱼,发现嗅觉反应在气味检测方面存在显著差异。在 4 分钟的间隔内记录了鱼的运动和摄食反应,结果表明,随着特定氨基酸浓度从 0.01 M/L 增加到 0.08 M/L,鱼的反应性增加。不同种类的氨基酸之间存在显著差异,其中 L-精氨酸和 L-色氨酸的反应性较高。观察了施用 L-氨基酸之前和之后的嗅觉上皮,发现施用氨基酸样品中纤毛顶端膨胀,存在显著差异。使用 Illumina HiSeq 2500 进行 RNA 测序,分别从 L-精氨酸和 L-色氨酸两种氨基酸获得 40326272 和 35794904 个干净读段,超过 845% 的读段被映射到参考基因组。比较两种 L 型氨基酸的基因表达,16701 个单基因显著差异表达,包括 10142 个上调基因和 6503 个下调基因。检测到 100 个嗅觉受体基因,这些基因包括:嗅觉受体 (OR)、犁鼻器受体 (VR) 和微量胺相关受体 (TAAR),嗅觉类蛋白质 (OLFM) 基因水平较低。然后选择 OR 表达基因进行进一步的定量 RT-PCR 分析。通过使用基因本体论 (GO) 和京都基因与基因组百科全书 (KEGG) 对差异表达基因进行分析,发现多个基因参与嗅觉活动,例如信号传导、单个生物体信号传导、细胞通讯和嗅觉传导。这些转录组分析提供了关于大黄鱼嗅觉相关基因在 L 型氨基酸方面的表达的清晰信息。此外,这项研究还帮助我们确定哪种 L 型氨基酸对鱼来说是有效的吞食刺激剂,以及如何将其用于鱼饲料中,从而增加鱼的蛋白质摄入量。