临床与实验药理学杂志

抽象的

轮枝菌素 A 通过诱导细胞凋亡抑制平滑肌肉瘤和恶性周围神经鞘瘤的生长

Zewdu A、Lopez G、Braggio D、Kenny C、Constantino D、Bid HK、Batte K、Iwenofu OH、Oberlies NH、Pearce CJ、Strohecker AM、Lev D、Pollock RE *

目的：软组织肉瘤 (STS) 的异质性是开发有效疗法面临的主要挑战。STS 亚型由 50 多种不同病因的组织学亚型组成，进一步分为简单核型和复杂核型。由于与基因复杂的 STS 相关的基因异常数量众多，开发针对此 STS 群的疗法尤其具有挑战性，但又十分必要。Verticillin A 是一种具有抗癌活性的小分子天然产物；然而，这种药物的疗效从未在 STS 中得到评估。因此，本研究的目的是探索 Verticillin A 作为潜在的 STS 疗法。

方法：我们进行了生存 (MTS) 和克隆形成分析，以测量该药物对核型复杂的 STS 细胞系（恶性外周神经鞘瘤 (MPNST) 和平滑肌肉瘤 (LMS)）的生存力和集落形成能力的影响。通过膜联蛋白 V/PI 流式细胞术分析和测量荧光标记的裂解 caspase 3/7 活性研究了轮枝菌素 A 对细胞凋亡的体外影响。通过流式细胞术测量碘化丙啶插入来评估对细胞周期进程的影响。使用 MPNST 异种移植模型进行体内研究。处理肿瘤并使用免疫组织化学 (IHC) 分析轮枝菌素 A 对生长 (Ki67) 和细胞凋亡 (裂解 caspase 3) 的影响。

结果：使用轮枝菌素 A 处理导致 STS 生长减少，24 小时后细胞凋亡水平增加。100 nM 轮枝菌素 A 在 24 小时后诱导细胞生长显著停止（LMS1、S462、ST88、SKLMS1 和 MPNST724 分别减少 96.7%、88.7%、72.7%、57% 和 39.7%）。我们在所有 MPNST 和 LMS 细胞系中观察到细胞周期无停滞、膜联蛋白升高和裂解 caspase 3/7 活性增加近两倍。与肉瘤细胞系相比，对照正常人类雪旺细胞 (HSC) 和主动脉平滑肌细胞 (HASMC) 对轮枝菌素 A 处理的耐受性更高，尽管在最高治疗剂量下 HSC 中观察到毒性。体内研究反映了体外研究结果：到第 11 天，在用 0.25 和 0.5 mg/kg 轮枝菌素 A 治疗的 MPNST724 异种移植模型中，肿瘤大小显著缩小。此外，对肿瘤的 IHC 评估表明，在用轮枝菌素 A 治疗后，裂解的 caspase 3 增加，增殖 (Ki67) 减少。

结论：由于此类疾病中存在大量遗传异常，因此在治疗核型复杂的 STS 方面取得进展十分困难。因此，迫切需要发现和研究新型疗法。我们的数据表明，轮枝菌素 A 通过诱导细胞凋亡选择性抑制 MPNST 和 LMS 生长，同时对正常细胞的影响极小至中等，这表明，经过额外的临床前验证后，轮枝菌素 A 可作为 MPNST 和 LMS 的潜在治疗方法。