微生物与生化技术杂志

抽象的

一种用于动物和食品样品中弓形虫检测的高灵敏度嵌套 PCR 方法

玛丽亚·维塔莱、保拉·加卢佐、维多利亚·库罗、卡塔琳娜·戈兹兹克、多梅尼科·斯基拉奇和文森佐·迪·马尔科·洛·普雷斯蒂

弓形虫是全球范围内一种主要通过食物和水传播的寄生虫。许多温血动物的组织和肉类样本可能含有慢性弓形虫病的组织囊肿。水和蔬菜可能会被受感染的猫的粪便中排出的寄生虫卵囊污染，而猫是这种寄生虫的最终宿主。

本文介绍了一种用于弓形虫检测的灵敏 PCR 方法。第一步扩增了密切相关的弓形虫和犬新孢子虫中 28S 和 18S rDNA 之间的区域；RFLP 分析将该 DNA 与两种形态相同的寄生虫区分开来。虽然犬新孢子虫目前尚未参与人类传播，但它对动物健康很重要，因为它是导致牛流产的主要原因。

嵌套 PCR 用于稀释测定掺有弓形虫寄生虫 DNA 的猪肉香肠样品。分析表明，最多可检测到 200fg，相当于仅两个单一寄生虫。实时 PCR 可获得弓形虫的类似检测限，但实时方法需要特殊的耗材和昂贵的设备。