植物病理学与微生物学杂志

抽象的

一种简单、快速、高效的番茄果实中凤梨花叶病毒RNA分离方法

Amal Souiri、Mustapha Zemzami、Khadija Khataby、Hayat Laatiris、Saaid Amzazi 和 Moulay Mustapha Ennaji

在植物中 RNA 病毒病原体的分子检测中，主要关注的是提取的 RNA 是否质量良好。有多种方法可以从富含多糖和缺乏多糖的组织以及其他难处理的植物中分离 RNA。然而，使用耗时耗试剂的方法以及涉及危险化学品的方法有些麻烦且存在问题，尤其是当不需要用于特定目的时，例如从番茄果实中分离病毒 RNA，因此本文的目的就在于此。我们描述了一种替代的、简单且快速的从番茄果实中制备病毒 RNA 的方法，无需 RNA 提取和纯化步骤，以Pepino 花叶病毒 ( PepMV ) 为例。

该方法采用机械处理和悬浮在水中。通过光谱读数判断获得的 RNA 的质量，并在 RT-PCR 测定中进行验证。将所用的方案与常用的 TRIzol 方法进行了比较。结果表明，与 TRIzol 方法相比，使用所提出的方法获得的 RNA 的产量和质量是高效的，产量很高。此外，所开发的方法成功地实现了RT-PCR 中PepMV预测条带的灵敏和可重复检测。因此，可以常规地从番茄果实中对PepMV进行分子检测，而无需进行繁琐的 RNA 分离。此外，与使用昂贵的商业试剂盒和涉及有毒化学品的其他方法相比，这将使感染番茄作物的其他 RNA 病毒的诊断更容易、更省时。最后，所描述的既定方法将有效地促进全球番茄作物的植物检疫和认证计划战略。