水产养殖研究与发展杂志

抽象的

虾 (Pandalopsis Japonica) 几丁质合酶 cDNA 的分子表征和表达分析

Md. Hasan Uddowla、Ah Ran Kim、Won-gyu Park、Hyun-Woo Kim*

甲壳类动物的生长是通过蜕皮进行的，即外骨骼的周期性脱落。了解与周期性蜕皮周期相关的几丁质代谢基因对于十足类甲壳类水产养殖的各种应用都很重要。几丁质合酶是几丁质生物合成途径中的重要酶，在蜕皮后新角质层的合成中起着重要作用。在本研究中，我们通过基于 PCR（聚合酶链反应）的克隆和生物信息学分析相结合的方法，从日本 Pandalopsis japonica 中分离出编码几丁质合酶 (PajCHS) 的全长 cDNA。已鉴定的 PajCHS 编码一种跨膜蛋白，具有 1525 个氨基酸残基（175 kDa）。与昆虫的其他 CHS 进行比较发现，PajCHS 包含三个结构域：N 端结构域 A、催化结构域 B 和 C 端结构域 C。催化结构域 B 内和附近的三个保守基序 (EDR、QRRRW 和 SWGTR) 也保存良好，表明 Paj-CHS 具有功能活性。N 端和 C 端结构域内跨膜螺旋的变化表明每个 CHS 的方向可能不同。系统发育分析表明，PajCHS 是昆虫物种 CHS1 组成员的直系同源物。然而，组织表达谱表明表皮、肝胰腺、肠道和鳃是 PajCHS 转录本的主要产生位点，这与昆虫 CHS1 有很大不同。 qPCR结果显示，眼柄切除和20羟基蜕皮激素（20E）注射均增加了PajCHS mRNA的表达水平，提示PajCHS1的表达可能受内源性20E控制。