微生物与生化技术杂志

抽象的

虾酶解抗氧化肽的表征与纯化

刘雪琴

介绍：

用工业胰蛋白酶（0.1%）对从机械加工中获得的 Penaeus kerathurus 虾头进行水解。水解反应通过化合物的热灭活（95°C）和离心结束。通过生化分析对产生的蛋白质水解物进行蛋白质含量、总游离氨基酸（FAA）、总挥发性氮（TVB-N）和电泳 SDS-PAGE 图谱分析。评估了乳化能力、脂肪吸附和起泡性等实用性能。与粗虾头蛋白相比，酶水解的结果表明蛋白质含量和 FAA（17.22%）显著增加（p < 0.05）。本研究中使用的低浓度胰蛋白酶足以溶解底物，导致蛋白质含量和 TVB-N 水平显著增加（< 6mg/100g），这明显低于为海洋产品制备的含量。虾废物是虾青素的主要来源，虾青素与蛋白质形成复合物，蛋白质隔离物和类胡萝卜素已知具有抗氧化活性。已完成研究，以使用细菌蛋白酶改善虾废物的水解以获得具有抗氧化活性的富含蛋白质的含量。使用部分因子方法评估了三个工艺因素（即对废物的特异性酶结合、孵化温度和时间）对类胡萝卜素恢复、蛋白质含量、三氯乙酸 (TCA) 可溶性肽化合物和二苯苦基氯化肼 (DPPH) 检测活性的影响。处理虾等贝类会产生大量固体废物，约占整个虾重量的 35-45%。这些废物很快就会变成宝石，从而导致生物问题。此外，由于虾废弃物富含蛋白质、几丁质、类胡萝卜素和催化剂，近年来已证明回收这些重要成分作为有色产品具有极高的价值。虾青素是虾废弃物中的主要类胡萝卜素，以胡萝卜素蛋白结构的形式存在，其中类胡萝卜素与蛋白质结合。类胡萝卜素与蛋白质的复合导致贝类中出现不同的颜色，并使类胡萝卜素保持稳定性，而类胡萝卜素本来就非常不安全。人们已尝试从虾废弃物中回收类胡萝卜素，无论是作为类胡萝卜素还是作为胡萝卜素蛋白复合物。人们已对从贝类废弃物中回收类胡萝卜素和胡萝卜素蛋白进行了研究。人们已利用水溶性萃取和油萃取从虾废弃物中回收类胡萝卜素，并已说明其在不同储存条件下的安全性。人们已对虾废弃物的酶水解进行了研究。发现可以提高类胡萝卜素的油提取率。可以通过酶促和成熟方法限制虾废物中的胡萝卜素蛋白。螯合剂如EDTA和蛋白水解化合物胰蛋白酶已被用于从虾废物中回收胡萝卜素蛋白。用胰蛋白酶水解雪蟹废物，然后用硫酸铵沉淀，可产生类胡萝卜素含量增加的胡萝卜素蛋白。

方法：

从当地市场收集了包括头部和甲壳在内的印度对虾残渣，并在冷藏条件下运到研究中心。使用前，将材料在台式立式成型机（Robo-Coupe）中均质化。使用来自 Genencor 公司的细菌蛋白酶 Alcalase 进行水解。在本研究中，使用虾胶冻干粉作为原料，水解从虾胶原料中分离出的蛋白酶产生菌株产生的蛋白酶。        

结果：

将 10g 虾粉混合物溶解在 50 mL 纯净水中，并使用 1M HCl 将溶液的 pH 值调节至 6.0。然后，以催化剂与底物的比例添加 ST-1 蛋白酶。将混合物在 50