Hassan Dana、Ali Mazraeh、Ghanbar Mahmoodi Chalbatani、Vahid Marmari、Habibollah Mahmoodzadeh、Ali Ghamari、Fateme Moazzen、Mohammad Ebrahimi 和 Narges Mehmandoost
简介：ALCAM 是一种糖蛋白，属于免疫球蛋白家族，在细胞生长、存活和运动中发挥重要作用。这种蛋白质还有助于结直肠癌和乳腺癌中肿瘤侵袭的发展，通常被视为癌症干细胞标志物。ALCAM 是一种细胞表面抗原，在结直肠癌和乳腺癌等一些癌症中高表达，具有诊断和治疗这些癌症的潜力。目标：与其他膜蛋白一样，ALCAM 是结直肠癌和乳腺癌治疗的潜在靶点，因此，本研究旨在克隆和表达 C2 和 V 结构域，以用于实际诊断和补救计划。方法：在本研究中，使用在线工具优化了 C2 和 V 结构域的序列，以便在原核宿主中表达，并将其克隆到 pET-28a 表达质粒中。采用热激法将重组质粒pET-28a转化大肠杆菌BL21(DE3)细胞，用SDS-PAGE技术检测重组V和C2结构域的表达。结果：合成的C2和V结构域基因位于NcoI/BamHI和XhoI酶切位点之间，并克隆到pBSK(+)载体中。通过菌落鉴定和酶切鉴定，证实pET28a中存在这些基因。在大肠杆菌BL21DE3中表达了C2和V结构域基因。SDS-PAGE技术结果证实了重组23和29kDa C2和V结构域在细菌表达系统中的表达。结论：C2和V结构域基因在大肠杆菌中以重组形式表达。这些重组片段可以作为诊断和治疗候选物用于结直肠癌和乳腺癌患者的筛查和癌症治疗。