生物能量学：开放获取

抽象的

胰腺 b 细胞线粒体生理学的比较分析

Nagendra Yadava、Chul Kim、Pinal Patel、Lindsey M. Gouvin、Melissa L. Brown、Ahmed Khalil、Elizabeth M Henchey 和 Alejandro P. Heuck

人们认为 b 细胞的线粒体代谢是高度特化的。由于胰岛/b 细胞数量不足，使用分离的线粒体直接将其与其他细胞进行比较受到限制。在本研究中，我们将 INS1E/b 细胞的线粒体代谢与完整和透化状态下的其他细胞进行了比较。为了选择性地透化质膜，我们评估了结合微孔板呼吸测定法使用穿孔素 O (PFO)。PFO 是一种基于活性胆固醇阈值水平与膜结合的蛋白质。因此，除非活性胆固醇在线粒体中达到阈值水平，否则它们预计不会受到 PFO 的影响。细胞色素 c 敏感性测试表明，在 PFO 透化细胞中，线粒体的完整性得到完全保留。我们的数据显示，在 INS1E 细胞中观察到的寡霉素不敏感呼吸作用随时间下降是由于呼吸链的底物供应有限。我们预测它与涉及代谢物在细胞质和线粒体之间穿梭的 b 细胞特异性代谢有关。在透化 b 细胞中，由于 TCA 循环效率低下，复合物 I 依赖性呼吸要么是短暂的，要么是缺失的。通过对 CO2 释放的分析证实了 TCA 循环不足。这可能与 NAD+ 水平较低有关，NAD+ 是 TCA 循环中产生 CO2 的反应所必需的辅助因子。b 细胞表现出相当的氧化磷酸盐和呼吸能力，不受呼吸介质中无机磷酸盐 (Pi) 水平的影响。它们在不同底物上表现出较低的呼吸 ADP 刺激。我们相信这项研究将大大增强我们对 b 细胞线粒体代谢的理解。