植物病理学与微生物学杂志

抽象的

逆转录环介导等温扩增技术检测马铃薯卷叶病毒外壳蛋白基因

穆罕默德·阿明·阿尔马西、侯赛因·贾法里、阿布巴克尔·莫拉迪、内达·赞德、迈赫迪·阿格哈普尔·奥贾格坎迪和萨伊德·阿格哈伊

环介导等温扩增试验以高特异性和灵敏度扩增 DNA/RNA。在本研究中，我们描述了一种优化的逆转录-LAMP 检测方法，用于检测马铃薯卷叶病毒。首先，进行 DAS-ELISA 检测，以检测包含 40 个可疑样本的病毒。最后，两个样本被检测为阳性样本。然后，通过 RT-PCR 和 RT-LAMP 方法验证阳性样本。此外，结果表明，与 RT-PCR 相比，RT-LAMP 检测的灵敏度提高了 40 倍，速度提高了 4 倍。RT-LAMP 检测是在水浴中完成的，无需任何热循环仪或先进的实验室设施。此外，在 RT-LAMP 反应中，通过焦磷酸镁产生的浊度检测阳性样本。有趣的是，使用 CaCl2 代替
反应中产生焦磷酸钙的 MgSO4 可以显著提高浊度的稳定性和浓度。因此，它可以成为 MgSO4 的有趣替代品。总体而言，新开发的 RT-LAMP 检测方法是一种灵敏、特异且低成本的早期检测马铃薯卷叶病毒和其他病毒性植物病原体的方法。