抽象的

以肿瘤坏死因子-α分离的人脐静脉内皮细胞为对照细胞检测炎症循环内皮细胞

Junpei Tochikubo、Naoyuki Matsuda、Yoshimi Ota、Tomoko Higashi、Yudai Takatani、Masato Inaba、Yushi Adachi 和 Norihiko Shiiya

背景:伴有弥漫性血管内凝血 (DIC) 的全身炎症反应综合征 (SIRS) 是危重患者的一种严重疾病,与血管内皮损伤的进展密切相关。早期诊断对于防止器官功能障碍的进展至关重要。循环内皮细胞 (CEC) 可能会在血管内皮损伤中增加,并在 DIC 诊断中发挥重要作用。然而,CEC 的检测方法尚未标准化。本研究旨在建立一种在重症监护环境中检测 CEC 的方法。我们使用被肿瘤坏死因子-α (TNF-α) 从培养皿中分离的人脐静脉内皮细胞 (HUVEC) 作为 CEC 的对照细胞。
方法:将培养的 HUVEC 孵育在含有 TNF-α (100 ng/mL) 的培养基中,并将 24 小时后从培养皿中分离的细胞用作 TNF-HUVEC。使用流式细胞术 (FC) 分析正常 HUVEC、TNF-HUVEC 和血细胞的细胞表面分子,以寻找检测 CEC 的适当标记物。将正常 HUVEC 和 TNF-HUVEC 添加到血液中,并使用 FC 和免疫珠法 (IB) 进行检测,以比较两种方法。使用 FC 测量健康志愿者和重症监护病房 (ICU) 患者中的 CEC。
结果: CD146 和 CD105 在 HUVEC 中高度表达,并且有利于将 UVEC 从全血细胞中分离出来。正常 HUVEC 在 FC 中的平均检测率为 75%,在 IB 中为 82%。然而,TNF-HUVEC 的平均检测率为 FC 中的 64%,在 IB 中的 27% (p < 0.05)。20 名健康志愿者和 16 名 ICU 患者的平均 CEC 计数分别为 2.8 个细胞/毫升和 4.3 个细胞/毫升。在一名患有 SIRS 诱发 DIC 的 ICU 患者中,CEC 升高了 49 个细胞/mL。
结论: CD146 和 CD105 适用于检测血液中的内皮细胞。在严重炎症状态下,FC 检测内皮细胞优于 IB。

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