细菌学与寄生虫学杂志

抽象的

通过室间质量评估开发和检测用于巨片吸虫特异性血清诊断的试验样品

Vu Quang Huy、Tran Thien Trung、Ha Manh Tuan、Vu Chi Thanh、Le Van Chuong、Nguyen Lam Duc Vu、、Huynh Thi Diem Phuc、Bui Quang Sang

目的:建立采用室间质评方案的抗巨片吸虫抗体特异性血清学诊断样品生产流程,并对试验样品的均一性和稳定性进行评价。

方法：本实验研究收集了经 ELISA 筛选后含有抗巨型肝吸虫抗体的样本，随后通过蛋白质印迹法进行确认。所有样本均经过检测，发现对其他蠕虫，尤其是吸虫抗体呈阴性。样本对抗 HIV-1 和 -2 抗体、抗 HCV 抗体和 HBs 抗原也呈阴性。样本采用冻干和冷冻方法制备，每 2、4、8、12 和最多 24 周评估一次稳定性和均一性。

结果：制备了3批含有3个水平的抗大片吸虫抗体的血清样品，其中DK1批的光密度OD=0.350±0.037，DK3批和DL3批的光密度OD=0.653±0.046，DL1批的光密度OD=0.850±0.047（波长450nm）。Western印迹法检测发现抗大片吸虫抗原的特异性IgG抗体对8～9kDa蛋白（P8-9）、28kDa蛋白（P28）和42kDa蛋白（P42）均呈阳性。Fisher检验证实试验样品为均质性（F统计量0.05），24周内稳定性良好（t统计量0.05）。

结论：采用冻干冷冻法可制备出经室间质评定用于抗巨片吸虫抗体特异性血清学诊断的试验样品，且样品的均一性及稳定性可持续24周。