细菌学与寄生虫学杂志

抽象的

开发灵敏的嵌套实时 PCR 方法用于诊断小鼠模型中弓形虫病的急性和慢性阶段

Parisa Mousavi、Hossein Mirhendi、Hossein Keshavarz Valian、Saeedeh Shojaee、Shirzad Fallahi、Armin Farhang、Mohammad-Ali Mohaghegh 和 Rasool Jafari

弓形虫是一种细胞内寄生虫，可引起多种临床表现。弓形虫病的急性期和慢性期被认为是人类等哺乳动物宿主的有核细胞中存在活跃增殖的速殖子，并通过血液传播到身体的其他部位，随后形成组织囊肿。本研究旨在评估嵌套实时聚合酶链反应 (PCR) 与传统实时 PCR 对实验室小鼠弓形虫病急性期和慢性期的诊断价值。为了诱发急性弓形虫病，将 103 个弓形虫 RH 株速殖子腹膜内接种到 25 只 BALB/c 小鼠体内。为了诱发慢性弓形虫病，将寄生虫皮下感染小鼠，然后在注射后第 1 天至第 14 天用磺胺嘧啶治疗。从血液和脑组织中提取基因组 DNA。针对 529 bp 重复元件 (RE) 进行了实时和嵌套实时 PCR。使用嵌套实时 PCR，所有急性感染小鼠弓形虫检测结果均为阳性，21 只小鼠的实时 PCR 检测结果为阳性。在慢性期，所有血液样本的实时 PCR 检测结果均为阴性，3 只小鼠的嵌套实时 PCR 检测结果为阳性。然而，在 25 个脑样本中，显微镜、实时 PCR 和嵌套实时 PCR 方法分别有 28%、52% 和 72% 呈阳性。本研究结果表明，分子方法对急性弓形虫病的诊断具有很高的灵敏度。在慢性期，血液样本不适合检测感染，可以使用其他组织样本代替。此外，与传统实时 PCR 相比，嵌套实时 PCR 具有更高的灵敏度。