微生物与生化技术杂志

抽象的

糖尿病二型与贫血有关

卢列塔

介绍：

本研究的目的是：通过检测糖化血红蛋白 (HbA1c) 衍生物来跟踪 2 型糖尿病患者，但 HPLC 方法在 HbA1c 检测中的重要性在于：诊断、监测、跟踪、获得 2 型糖尿病治疗，还获得了以下结果：糖尿病、糖尿病前期、患者胰岛素插入、单一疗法，还发现糖尿病患者的 HgB 形式异常，例如血红蛋白病，并且在研究期间我们发现通过 HPLC 进行 HbA1c 测试的诊断方向适用于某些病理，这在其他病理中既具有预防作用又具有诊断作用。这项研究在 Olive 医疗和实验室诊断中心持续了 1 年多。

方法：

HPLC（高效液相色谱）G8 Tosoh，独家经销商：科索沃 Keis 集团制药公司。我们首次在我国使用 HPLC 进行 HbA1c 测定。G8 分析仪是 Tosoh 领先的下一代 HPLC 测试系统，可快速准确地获得 HbA1c 结果。分析仪用溶血和洗涤液稀释全血样本，然后将少量处理过的样本注入 TSKgel Glyco HSi 变体柱。通过利用柱树脂表面的阳离子交换基团与分步梯度洗脱中的血红蛋白成分之间的离子相互作用差异实现分离。随后，通过使用具有特定盐和 pH 浓度的洗脱缓冲液 HSi 变体 1、2 和 3 进行分步洗脱，从柱材料中去除血红蛋白级分（指定为 A1a、A1b、F、LA1c、SA1c、A0 和 H-V0、H-V1、H-V2）。分离的血红蛋白成分通过 LED 光度计流动池，在 415nm 处测量吸光度的变化。G8 软件对原始数据进行积分和缩减，然后计算每个血红蛋白级分的相对百分比。打印输出包括数值结果和色谱图。这表示每个峰值级分的吸光度与保留时间的变化。分析仅需 1.6 分钟。该研究针对 150 名患者进行，其中 80% 为 II 型糖尿病患者，年龄为 40-65 岁，HbA1c 范围为 6.9-11%，HbA 为 6-8，HbF 超过 1%-8%（48% 的病例为 HbF 阳性），对照组为非糖尿病、可疑、血脂异常、无 II 型糖尿病迹象的患者，检测的原因是他们具有高度胰岛素抵抗或中度，其中一些患者患有多囊卵巢综合征。除了 HPLC 方法在测试 HbA1c 方面的绝对准确性之外，在本研究中我们发现 II 型糖尿病患者的 HbF 呈阳性，

 

这会导致贫血，而贫血的原因被认为是肾功能受损，例如糖尿病肾病 - II 型糖尿病的并发症，但由于我们无法对所有患者进行 Hb 电泳检测，因此先天性异常 HbF 和 II 型糖尿病之间的机制尚不清楚。从这些实验室发现来看，HbF 会导致病理增加：除了先天性形式外，其水平升高也见于恶性贫血、溶血性贫血、地中海贫血、甲状腺机能亢进、深静脉血栓形成等病例。LA1c 是糖化血红蛋白的不稳定形式，在存在氨基甲酰化血红蛋白（尿素、肾病患者）和乙酰化血红蛋白（酒精滥用、肝病等）的情况下可能会增加，当然血糖也会升高。

 当血糖高时，葡萄糖分子附着在红细胞上，高血糖时间越长，葡萄糖与血红蛋白结合越多，糖化血红蛋白就越高。所以从这项研究中我们发现大约35%的病例LA1c阳性，此时糖尿病肾病已经开始，这可以通过微量白蛋白尿阳性来证实，并有肾病科医生的报告。国内有150例HbF值异常，而这150例病例中没有其他Hb异常，所以另一方面我们发现HbF阳性与血清同型半胱氨酸容易或中度升高或高同型半胱氨酸血症之间存在相关性，其中10％为MTHFR突变阳性（这些有机会接受检测的患者中约15％，他们的实验室检查结果是血清同型半胱氨酸值为15-17，参考范围为成人5-15μmol / L，方法免疫分析-Imulite-2000分析仪定量测定人血清中的L-同型半胱氨酸（西门子），这些病例的其他回忆资料部分伴有腿部水肿和腿部疼痛等临床症状，因此我们知道高同型半胱氨酸是心血管疾病，冠心病，早期动脉硬化性疾病，动脉血栓栓塞症的指标，并且这种风险是由高胆固醇血症，也由同型胱氨酸尿症等遗传缺陷引起。

结果：

总同型半胱氨酸 (tHcy) 已成为评估心血管疾病的重要危险因素。tHcy 是一种含硫醇的氨基酸，由细胞内蛋氨酸去甲基化产生，Hcy 因此作为一个池，随后可被清除用于通过叶酸依赖性酶蛋氨酸合酶的作用重新制造蛋氨酸，或通过 B6 依赖性转硫途径重新制造半胱氨酸，叶酸和 B6 依赖是导致贫血与 II 型糖尿病有关的另一个原因，因为存在阳性 HBF 形式，这告诉我们需要进行越来越多的测试，因此这些让我们跟进血管外科医生的会诊，他需要进行 2 个突变的 MTHFR 和其他止血测试。MTHFR 突变结果来自德国 Synlab 实验室。11% 的病例中的 MTHFR 突变 c677T 为突变阳性。

结论：

我们得出结论，HPLC 可以毫无保留地称为金标准诊断方法，因为它已被证明是最好的方法。我们 20% 的患者 HbA1c 值在 6-6.4% 之间，有糖尿病前期风险，约 10% 的患者 HbA1c 值超过：6.5%，首次检测时，考虑患有糖尿病，约 25% 的患者控制良好：值 6.6-7%，根据 ADA（美国糖尿病协会标准）控制不佳：HbA1c 值为 7-8%，约 45%。从 HBF 结果和 HbA1c 结果的机制来看，使用 HPLC 可以对同一糖尿病患者进行早期诊断：糖尿病并发症，如肾脏损害、肝脏损害、贫血、早期动脉硬化、血栓栓塞、ICV 风险等。