干细胞研究与治疗杂志

抽象的

双蛋白样激酶 1 通过抗凋亡途径增加结直肠癌细胞的化学耐药性

Lianna Li、Kierra Jones 和郝梅

背景：结直肠癌 (CRC) 是美国第三大常见癌症，也是癌症相关死亡的第二大原因。癌症干细胞 (CSC) 被认为是 CRC 复发的主要原因。特异性干细胞标志物双皮质素样激酶 1 (DCLK1) 在 CRC 的肿瘤发生和进展中起着关键作用。DCLK1 的上调与不良预后相关。DCLK1 是否与 CRC 细胞化学耐药性增强相关尚不清楚。我们旨在揭示 DCLK1 与 CRC 细胞化学耐药性的关联及其潜在的分子机制。

方法：利用HCT116细胞（WT）建立稳定的DCLK1过表达细胞（DCLK1+）。用不同剂量的5-氟尿嘧啶（5-Fu）处理DCLK1+和WT细胞24或48小时。使用MTT分析评估细胞活力并确定5-Fu的IC50。使用定量实时PCR测定caspase-3（casp-3）、casp-4和casp-10的基因表达。使用Western印迹和免疫荧光研究裂解的casp-3表达。

结果：结果表明，无论是 24 小时还是 48 小时治疗，5-Fu 对 DCLK1+ 细胞的 IC50 均显著高于 WT 细胞（p=0.002 和 0.048），表明 DCLK1+ 细胞的化学抗性增强。与 WT 细胞相比，5-Fu 治疗后 DCLK1+ 细胞中 casp-3、casp-4 和 casp-10 的基因表达受到显著抑制（p=7.616e-08、1.575e-05 和 5.307e-08）。与 WT 细胞相比，5-Fu 治疗后 DCLK1+ 细胞中裂解的 casp-3 量和 casp-3 阳性细胞显著减少（p=0.015）。

结论：总之，我们的结果表明，DCLK1 过表达通过抑制凋亡途径中关键 caspase 的基因表达和凋亡途径的激活增强了 CRC 细胞对 5-Fu 治疗的化学耐药性。DCLK1 可以成为有效治疗 CRC 患者的一个有趣的治疗靶点。