细菌学与寄生虫学杂志

抽象的

表达防御素的转基因阴沟肠杆菌在帕帕塔西白蛉中进行副转基因的动力学和适应度成本

Rangin Abassi、Maryam Akhlaghi、Mohammad Ali Oshaghi、Amir Ahmad Akhavan、Mohammad Reza Yaghoobi-Ershadi、Rounak Bakhtiary 和 Fatemeh Mohtarami

背景： 阴沟肠杆菌亚种溶解菌是已知的帕帕塔西白蛉肠道菌群的共生菌，帕帕塔西白蛉是人畜共患皮肤利什曼病的主要媒介，被提名用于沙蝇的副转基因。在本研究中，我们评估了工程化阴沟肠杆菌的动态和适应度成本，以确定其是否可能成为帕帕塔西白蛉的“特洛伊木马” 。

方法：将E. cloacae工程菌株转化成持续表达活性的红色荧光蛋白加防御素 (EC-DR) 质粒，并通过幼虫食物喂养沙蝇群落。以野生型细菌 (EC-WT) 和完整食物作为对照。通过在 Tet-BHI 琼脂培养基上接种匀浆样本并计数荧光表达菌落，测试了沙蝇幼虫不同发育阶段 EC-DR 的适应性特征和动态。

结果： 在幼虫盆中添加一次细菌后，36 天后即可从幼虫肠道中分离出产生红色荧光蛋白的阴沟肠杆菌DR。多次施用 EC-DR 对二龄幼虫、蛹和成虫的羽化时间没有负面影响，但略微增加了P. papatasi幼虫的死亡率。实验还证实了P. papatasi中阴沟肠杆菌DR的跨龄传播缺乏或较弱。它对P. papatasi 的摄食行为和生存的适应度成本最小。

结论：本研究结果表明，E. cloacae DR 仅适合在成年阶段进行P. papatasi的副转基因，因为它不能跨阶段传播。