黄超、李艳鹏、田悦欣、郝志丹、陈福林、马艳玲
鼠李糖脂是一类非常有前景的生物表面活性剂,在许多工业应用中表现出极高的特性,但由于产量低和生产成本高而未能得到广泛应用。本研究利用代谢工程策略,将rhlAB和rhlC基因分别导入铜绿假单胞菌野生型菌株DN1,构建工程菌株DNAB和DNC,同时优化碳源、氮源等营养参数,以提高鼠李糖脂的产量。工程菌株DNAB和DNC分别通过增加rhlAB和rhlC基因的拷贝数,在相同条件下获得比DN1更高的鼠李糖脂产量。尤其以橄榄油和硝酸钠为最佳唯一碳源和氮源,工程菌株DNAB的鼠李糖脂产量最高,分别是DN1的1.28倍和1.25倍,工程菌株DNC的鼠李糖脂产量最高,分别是DN1的1.36倍和1.43倍;最佳C/N比为20时,工程菌株的鼠李糖脂比产量可分别提高到19.5 g/L和22.5 g/L,分别是DN1菌株的1.39倍和1.61倍。同时ESI-MS分析发现野生型与工程菌株所鉴定的鼠李糖脂存在差异,而通过改变RhlAB和RhlC的表达量,工程菌株所生产的鼠李糖脂以Rha-Rha-C10和Rha-Rha-C10- C10结构为主。