Michelle D de Oliveira、André S de Oliveira、Nina R Dutra、Rafael FO França、Eduardo R Honda、Fernando B Zanchi、Clovis A Neves、Cynthia C da Silva、Benedito AL da Fonseca 和 Sérgio O De Paula
由于 E 蛋白表达水平不足和折叠不正确，开发登革热重组亚单位疫苗的几次尝试都失败了。为了验证前体膜蛋白对 E 蛋白表达水平的重要性，我们通过将登革热 2 型和登革热 3 型病毒株的 prM 基因全长序列克隆到表达登革热 2 型病毒 E 蛋白截短版本的质粒中，构建了两个重组质粒。接下来，我们评估了这两个构建体对体外 E 蛋白表达水平的影响。我们的结果表明，这两个质粒都提供了正确的 E 蛋白表达，因为通过间接免疫荧光和免疫印迹法可以在转染的 Vero 细胞中检测到 E 蛋白表达。对细胞提取物的蛋白质印迹进行密度测定分析表明，转染 pCID2EtD3prM 的细胞中 E 蛋白的表达量高出 67.02%，这表明登革热 3 型病毒的 prM 序列可能更有效地协助 E 蛋白的正确加工。本研究结果可用于增加 E 蛋白抗原的体外生产，以用于疫苗和诊断目的。