干细胞研究与治疗杂志

抽象的

表达 hrGFP 的新型猪诱导性多能干细胞的建立和鉴定

廖玉晶、廖嘉欣、廖俊旺、袁国、刘玉展、陈一秀、陈立仁、杨振荣

自 2006 年以来，诱导性多能干细胞 (iPS) 已在各种动物物种中建立。猪是人类再生医学中潜在的有用模型，猪胚胎干细胞 (pES) 的特征与人类胚胎干细胞 (hES) 非常相似。在本研究中，通过在慢病毒载体中引入构建的四种人类转录因子 (Sox2、Oct4、Klf4 和 c-Myc)，从猪耳成纤维细胞 (pEF) 中产生了可追踪的人源化重组绿色荧光蛋白表达猪诱导性多能干细胞 (piPS/hrGFP+) 细胞。尽管经过反复传代培养，piPS/hrGFP+ 细胞在 20 个月内持续稳定地表达 hrGFP 信号超过 90 次。它们还保留了典型的定义特征，包括未分化状态下的持续增殖、ES 多能性标志物（Oct4、AP、SSEA-3、SSEA-4、TRA-1-60 和 TRA-1-81）的表达以及正常核型（36+XY）的维持。通过 EB 形成，还成功地从体外分化中揭示了三个胚胎胚层。对畸胎瘤的各种组织学分析和免疫组织化学染色揭示了来自三个胚胎胚层的各种组织，包括神经组织、含角蛋白的表皮组织、骨骼肌、平滑肌、软骨、脂肪组织和腺体结构。这些结果支持可以通过直接重编程从 pEF 产生 piPS/hrGFP+ 细胞，并且这些可追踪的 piPS/hrGFP+ 细胞将有利于未来在细胞移植和组织再生中的应用。