干细胞研究与治疗杂志

抽象的

人类角质形成细胞培养基的评价

法比亚娜·雷吉娜·泽维尔·巴蒂斯塔、尤萨拉·雷德尔和玛丽亚·贝阿特丽斯·普齐

人类角质形成细胞是皮肤组织工程所必需的，可用于临床应用的组织修复和再生。在进行细胞增殖时，必须在短时间内获得高细胞浓度。这些细胞的生长和维持通常需要使用 MCDB 153 培养基，该培养基中添加了动物源成分，例如生长因子和胎牛血清 (FBS)。这项研究的目的是评估基于 MCDB 153 培养基的不同配方对角质形成细胞增殖的影响。为此，我们进行了多项实验，以确定哪些补充剂对皮肤细胞培养很重要，实验采用 24 因子设计。皮肤样本取自四名同意接受皮肤脂肪切除术（整形外科手术）的患者 。这些碎片在 37ºC 下用 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 处理四小时。此外，将表皮与真皮分离，得到皮肤细胞。除 25 cm2 烧瓶外，还在 6 孔板和 96 孔板中进行批量培养。关于细胞生长和代谢的结果表明，角质形成细胞在含有胰岛素 (7.5 µg.mL-1)、牛垂体提取物-BPE (80 µg.mL-1)、表皮生长因子-EGF (0.08 µg.mL-1)、氢化可的松 (0.63 µg.mL-1) 和谷氨酰胺 ( 1 gL-1) 的 MCDB 153 培养基中完全长大。另一方面，实验设计中提出的培养基并未产生令人满意的细胞生长。此外，尽管在大多数情况下初始葡萄糖浓度较低，但细胞会大量产生乳酸，达到 1 gL-1。