微生物与生化技术杂志

抽象的

新型生物传感荧光蛋白HriCFP在大肠杆菌中的表达及应用

Hira Mehreen、Salma Saeed、Umut Gerlevik、Aamira Tariq、Ugur Sezerman、Zobia Noreen、张迅丽、Sammer-ul Hassan 和 Habib Bokhari*

环境中的准金属和重金属污染已成为全球性问题。因此，迫切需要开发有效且廉价的方法，以便高效监测这些环境污染物的危险水平。与传统的仪器方法相比，基于微生物细胞和荧光蛋白的生物传感器为分析环境污染物提供了相对方便和廉价的工具。小尺寸荧光蛋白可以承受变性剂、高温和宽 pH 范围的暴露。这些特性以及它们感测不同毒性分析物的潜力使它们成为开发现场检测生物传感器的合适候选者。本研究利用了一种名为 HriCFP 的新型荧光蛋白的生物传感潜力。HriCFP 在原核系统（革兰氏阴性大肠杆菌）中表达，在细菌细胞中表现出稳定和谨慎的表达。通过硝酸纤维素膜、低熔点琼脂糖和硅酸钠凝胶固定表达 HriCFP 的非致病性大肠杆菌，开发了全细胞生物传感器 (WCB)。这些固定化生物传感器对环境污染物（即重金属（Cu(II)、Hg(II)、As(III)）的检测灵敏度进行了测试。这些 WCB 在暴露于一系列重金属时表现出明显的荧光猝灭。这些生物传感器在 4°C 下可保持活性 12 天，表明它们具有长期稳定性和储存潜力。这项研究表明 HriCFP 可能比其他较大和多聚体蛋白质具有显著优势，因为它对宿主菌株代谢的影响最小，因此可以提高其更长时间的可持续性。