Sivaprasad Y、Bhaskara Reddy BV、Sujitha A 和 Sai Gopal DVR
采用体外基因表达策略生产花生芽坏死病毒 (PBNV) 外壳蛋白 (CP) 多克隆抗血清。将花生分离株中的 GBNV CP 基因克隆到 pQE-30UA 表达载体中,并转化到大肠杆菌 (M15) 细胞中。体外诱导 GBNV CP 基因表达,纯化重组蛋白 (~34 KDa) 并用于免疫兔子以产生 GBNV 特异性多克隆抗血清。抗血清在间接酶联免疫吸附试验 (ELISA) 中的滴度为 1:5000,并在蛋白质印迹中发生特异性反应。所得抗血清用于开发免疫捕获逆转录聚合酶链反应 (IC-RT-PCR) 测定法,并将其灵敏度水平与 ELISA 进行比较,以检测 GBNV 分离株。重组抗血清成功检测出印度南部经济作物和杂草宿主中 GBNV 的自然感染