植物病理学与微生物学杂志

抽象的

苜蓿植物（ Medicago varia L.）国产品种‘Burgaltai’的基因转化及其叶片大小的增加

Uuganzaya Myagmarjav*、Enkhchimeg Vanjildorj、Altantsetseg Khajidsuren

'Burgaltai' 品种的苜蓿是蒙古最重要的牧草，由于异花授粉，其产量在过去几十年中一直在下降。本研究通过农杆菌介导的遗传转化转移拟南芥的生长调节因子AtGRF2基因来增加 'Burgaltai' 品种的叶片大小。体外再生是从七天大的下胚轴和子叶外植体中进行的，用于愈伤组织诱导。诱导的愈伤组织用于芽诱导和增殖。增殖的芽被带到根诱导培养基中。最佳愈伤组织诱导培养基为 MSB5（Murashige Skoog 培养基，添加 Gamborg 维生素）培养基，添加 2 mg/L 2,4-D、0.2 mg/L BAP 和 1 mg/L NAA，愈伤组织芽诱导和增殖培养基为 MSB5 培养基，添加 1mg/L BAP、0.1 mg/L NAA，增殖芽在添加 0.5 mg/L NAA 的半强度 MSB5 培养基中生根。对于遗传转化，下胚轴外植体用作初始来源。共测试了 235 个外植体进行转化，30 个外植体（12.7%）对潮霉素抗生素具有抗性并再生出小植株。将小植株移植到土壤中，并使用新鲜的幼叶进行 GUS 组织化学分析和 RT-PCR 进行确认。其中7个独立转基因植株（T6、8、11、12、13、15、22）已确认完全再生。转基因‘Burgaltai’苜蓿叶片大小比野生型增加0.7 cm ^2。T6和11株系在T1子代中表现出3:1的分离比（X2=0.04-0.42，p≤0.52-0.84）。