J. Alex Pasternak、Siew Hon Ng、Tobias Käser、François Meurens 和 Heather L. Wilson
体外用有丝分裂原刺激的猪外周血单核细胞 (PBMC) 和固有层单核细胞 (LPMC) 会表现出显著的动物间差异，导致难以解释杂交动物物种的反应。混合细胞群体外用 2.5 μg/ml Con A 或 2.5 ng/ml PMA 加 250 ng/ml 离子霉素 (PMAi；(仅限 LPCM)) 或单独用培养基刺激 72 小时。然后使用 Bioplex 检测法检测上清液中猪 IFNα、IFNγ、IL-10 和 IL-12 的细胞因子产生情况。未受刺激的 PBMC 具有显著的 IL-10 水平，并且在 Con A 存在的情况下，该组的中位数会降低。然而，Con A 确实会诱导该细胞群产生 IFNα 和 IFNγ，但不会产生 IL-12。相反，未受刺激和 Con A 刺激的 LPMC 产生的 IL-10、IFNα、IFNγ 微不足道，大多数动物的 LPMC 在 Con A 刺激下产生的 IL-12 微不足道。相反，用 PMAi 刺激的 LPMC 产生 IFNγ，表明细胞因子产生是丝裂原特异性反应。当我们追踪动物特异性反应时，我们观察到动物 PBMC 的离散子集对 Con A 有反应，IL-10 产生量相对于未受刺激的细胞显著增加或减少。此外，在 LPMC 中，一些细胞在 Con A 刺激下不产生 IL-12，但在 PMAi 刺激下产生量增加，而其他细胞在 Con A 刺激下产生 IL-12，但在 PMAi 刺激下不产生 IL-12。流式细胞分析显示，PBMC 是 CD3+ T 细胞 > CD21+ B 细胞 > CD172+ 髓系细胞的混合物，而 LPMC 主要由细胞毒性 T 细胞和自然杀伤细胞组成。LPMC 中 CD8α+CD4+ 抗原 T 细胞的百分比高于 PBMC。正如在杂交物种中预期的那样，动物对刺激物产生的细胞因子存在特异性差异，除非单独跟踪，否则可能会混淆结果的解释。