干细胞研究与治疗杂志

抽象的

胎牛血清、人血清和无血清/无异源物培养基中维持的人类牙髓干细胞的生长和分化

Rashi Khanna-Jain、Sari Vanhatupa、Annukka Vuorinen、George KB Sandor、Riitta Suuronen、Bettina Mannerstrom 和 Susanna Miettinen

简介： 牙髓干细胞(DPSC) 是一种可利用的细胞来源，可用于治疗受损组织的再生。目前扩增 DPSC 的技术需要使用胎牛血清 (FBS)。然而，动物源试剂在临床治疗中存在安全问题。通过在无血清/无异种培养基 (SF/XF-M) 或含有人血清的培养基 (HS-M) 中扩增 DPSC，可以消除这些问题。因此，我们的研究目的是确定适合 DPSC 的细胞培养基替代品。

方法：我们研究了 HS-M 或 SF/XF-M 中 DPSC 的分离、增殖、形态、细胞表面标志物（CD29、CD44、CD90、
CD105、CD31、CD45 和 CD146）、干性标志物表达（Oct3/4、Sox2、Nanog 和 SSEA-4）以及与 FBS-M 相比的体外多谱系分化。

结果：DPSC 在所有研究条件下均表达细胞表面和干细胞标志物。对在不同 HS 浓度下培养的细胞的增殖分析表明，在 20% HS-M 中分离并在 10% 或 15% HS-M 中传代的细胞支持细胞生长。在 SF/XF-M 中直接分离细胞不支持细胞增殖。因此，在 20% HS-M 中培养的细胞用于进一步的 SF/XF-M 研究。然而，与在 FBS-M 和 HS-M 中培养的细胞相比，SF/XF-M 中的 DPSC 增殖明显较低。此外，在细胞培养基中添加 1% HS 可以增强 SF/XF-M 中 DPSC 的增殖。在 FBS、HS 和 SF/XF 分化培养基中培养的细胞的成骨、软骨和脂肪形成分化效率存在差异。在 HS 分化培养基中观察到更明显的脂肪形成和成骨分化，然而，在 FBS-M 培养细胞中检测到更有效的软骨形成分化。

结论：我们的结果表明，HS 是 FBS 的合适替代品，可用于扩增 DPSC。SF/XF-M 的成分需要在细胞扩增性和分化效率方面进一步优化，以达到临床适用性。