干细胞研究与治疗杂志

抽象的

优化马间充质干细胞存活和迁移能力的指南

莎拉·布鲁克斯、辛西娅·德·弗里斯、马克·苏尔斯、黛博拉·J·盖斯特和简·H·斯帕斯

背景：尽管间充质干细胞 (MSC) 疗法在兽医学中被广泛使用，但并没有具体的指导原则来保证最佳的细胞存活和迁移。然而，为了确保最佳的临床使用，这一点是必不可少的。方法：在本研究中，分离并表征了马外周血 (PB) 来源的 MSC。为了确定长期冷冻保存的最佳参数，通过台盼蓝染色评估了不同二甲基亚砜 (DMSO) 浓度 (5-20%) 和解冻方法 (温控或手工解冻) 对 MSC 活力的影响。之后，仅使用 10% 的 DMSO 作为冷冻保护剂，不进行速率控制冷冻，对 MSC 的储存进行了 12 个月的评估。然后，评估了常用麻醉剂和注射凝胶对 MSC 活力的影响。最后，评估了 MSC 通过不同浓度透明质酸的迁移能力。结果：首先，我们证明 DMSO 浓度和解冻方法在解冻后 4 小时内对 MSC 活力没有显著影响。其次，麻醉剂具有高度细胞毒性，只有 10% 的 MSC 在麻醉剂存在后 3 小时内存活。透明质酸和氨基葡聚糖凝胶与 MSC 相容，在 48 小时内的随访中可实现高细胞存活率（超过 90%）。然而，在聚丙烯酰胺凝胶中，大约 80% 的 MSC 在 48 小时内死亡。最后，凝胶的浓度影响 MSC 的迁移能力。事实上，在 20mg/ml 透明质酸中，只有 60% 的 MSC在48 小时内附着在下层表面，而在 10mg/ml 相同物质中，几乎 100% 的 MSC 能够通过凝胶迁移。结论：本研究报告了马 PB 衍生 MSCs 临床应用的实用指南。