生物化学与分析生物化学

抽象的

具有九种不同催化活性的人类胎盘组织高分子量多蛋白复合物的主要蛋白质的鉴定

Evgeniya E Burkova、Pavel S Dmitrenok、Dmitrii V Bulgakov、Evgeny A Ermakov、Valentina N Buneva、Svetlana E Soboleva1 和 Georgy A Nevinsky*

人胎盘是一种保护、喂养和调节胚胎发育的器官。因此，鉴定和表征胎盘成分（包括蛋白质及其多蛋白复合物）是了解胎盘功能的重要一步。在这里，我们首次通过 MALDI MS 和 MS/MS 光谱法分析了人胎盘极其稳定的多蛋白复合物 (SPC，~1000 kDa)，使用蛋白质胰蛋白酶水解产物，经 SDS-PAGE 和 2-D 电泳分离蛋白质。由于几种不同蛋白质的随机结合而形成如此稳定的复合物的可能性很小。结果表明，SPC 含有十二种蛋白质：血红蛋白、碱性磷酸酶、细胞质肌动蛋白、人血清白蛋白、绒毛膜生长激素、热休克蛋白 β-1、过氧化物酶-1、78 kDa 葡萄糖调节蛋白、蛋白质二硫键异构酶 A3、血清转铁蛋白、膜联蛋白 A5 和 IgG。这 12 种蛋白质本身具有许多不同且重要的生物学功能，这些功能可能是复合物中这些蛋白质所固有的。此外，该复合物表现出九种不同的酶活性：DNase、RNase、ATPase、磷酸酶、蛋白酶、淀粉酶、过氧化氢酶、过氧化物酶（H2O2 依赖性）和氧化还原酶（H2O2 非依赖性）。来自三种胎盘的 SPC 制剂对这些反应的催化效率相当。结果表明，r(pU)23、r(pA)23 和 r(pC)23 的水解导致 1-22 聚体寡核苷酸的形成，而 microRNA mirR137 的消化是位点特异性的（3A-4U > 9U-10A > 8U-9U ≥ 15U-16A），导致仅形成四种主要产物。根据复合物中各个蛋白质的功能，可以考虑复合物的大量潜在功能，对胎盘蛋白复合物的研究进展可以促进对其生物学功能的认识。