Brotzmann V、Schuermann M、Kaltschmidt B、Kaltschmidt C 和 Sudhoff H
抗生素物质的筛选是药物开发过程中必不可少的工作步骤。有多种方法可用于测试其功效,可分为扩散法和稀释法。琼脂基培养基中的扩散法是一种定性方法,而通常在聚苯乙烯微量滴定板中执行的稀释法通常用于定量测定最低抑菌浓度 (MIC) 和最低生物膜抑菌浓度 (MBIC50)。在这些标准化测定过程中,药剂的物理性质(例如其疏水性和热不稳定性)经常被忽略。本研究比较了不同扩散测定的灵敏度以及改进的稀释测定对抗生素的热敏感性和疏水性的影响。我们将精油中的疏水性抗菌成分 1.8-桉油醇应用于病原体金黄色葡萄球菌,并研究了孵育时间、细胞培养容器和常用表面活性剂对测定的影响。本研究描述了一种优化的扩散试验和一种精确测定热不稳定疏水性抗生素物质的 MIC 和 MBIC50 的方案。我们的试验基于光密度测量和简单的结晶紫染色,因此可以轻松执行。我们得出结论,可以通过良好的扩散法对疏水性物质进行初步筛选。但是,对于 MIC 和 MBIC50 的测定,我们强烈建议使用清洁和蚀刻的玻璃管代替聚苯乙烯细胞培养板。发现使用表面活性剂 Tween 80 或 Tween 20 是不必要的,而且会伪造结果。总之,我们改进的标准技术可能有助于更好地量化疏水性抗生素(例如精油)的抗菌潜力。这可能会对作用方式产生新的见解,并进一步促进开发迫切需要的新型抗菌物质,以对抗常见抗生素的耐药性。