Tom H. Jin、Tianli Qu、Anant Raina、Peter Alexander 和 Eric Tsao
卡介苗 (BCG) 和重组 BCG (rBCG) 疫苗的基因来源可以追溯到减毒活牛分枝杆菌菌株。由于生物体活力对于刺激保护性免疫反应至关重要，因此监测活菌数量是疫苗质量控制的一个重要部分。菌落形成单位 (CFU) 测试一直是确定 BCG 活力的常规检测方法，并且是广泛接受的 BCG 效力替代方法。然而，CFU 分析问题重重且耗时。CFU 测试结果缓慢且高度可变，这是制造商和控制实验室寻找快速、更可重复的替代活菌计数检测方法的主要驱动力。Statens Serum Institut 开发了一种改进的三磷酸腺苷 (ATP) 发光检测法，并被 WHO 推广为替代活菌计数检测法。然而，在 ATP 测定法满足稳定性和可重复性的要求之前，必须建立样品制备和 ATP 提取过程中的某些条件。本研究的重点是确定 BCG/rBCG 制剂可靠的 ATP 分析过程所需的条件。使用我们改进的 ATP 测定方案，我们证明 BCG/rBCG 疫苗的 CFU 计数和 ATP 浓度之间的相关系数很高（加速稳定性样品的 R2=0.83，所有其他制剂的 R2>0.97）。ATP 发光测定法是一种快速、灵敏、可靠、非菌株特异性的减毒活分枝杆菌疫苗制剂活力定量方法。